辰辉创聚生物®抗体表达与纯化服务
辰辉创聚生物提供基于CHO和HEK293细胞的抗体表达与纯化服务,支持从微克到克级的不同规模需求。我们为科研机构和生物医药企业提供高质量的单克隆、多克隆及重组抗体,满足筛选、验证和临床前开发等多种需求。
实验方案灵活,涵盖载体构建、瞬时表达或稳定细胞株开发、亲和纯化和质控检测。整个过程由经验丰富的团队管理,确保数据完整,交付稳定可靠。
使用CHO-K1、CHO-S、HEK293等哺乳动物细胞,适合IgG、scFv、Fab等多种抗体结构。服务包括:
瞬时表达,适合快速获取中小规模样品
稳定细胞株构建,适合长期表达和放大生产
可选多种标签(His、Fc、Flag等),支持后续纯化和检测
辰辉创聚生物采用Protein A、Protein G或Protein L亲和纯化,结合离子交换和分子筛层析技术,根据抗体特性制定纯化方案。
纯化后抗体纯度一般在95%以上,浓度范围0.5–2 mg/mL,默认采用PBS缓冲液。
交付内容包括:
目标抗体溶液(指定浓度与缓冲体系)
质控数据报告(SDS-PAGE、SEC-HPLC、UV浓度测定)
纯化工艺参数概要
客户若有特殊缓冲体系、浓度或内毒素要求,可提前沟通,方案将相应调整。
技术成熟:多年抗体表达纯化经验,CHO表达系统优化生产工艺
快速交付:抗体表达最快7天起交付,高通量支持平行项目推进
数据可靠:提供SDS-PAGE、HPLC、ELISA等完整QC报告
灵活定制:可根据项目需求进行抗体定制服务、表达系统选择、标签添加等
1、科研合作 | 某大学生命科学研究院
项目目标: 构建高亲和力人源化单克隆抗体,用于特定细胞表面受体的功能研究。
技术方案: 利用CHO细胞瞬时表达系统表达抗体重链与轻链,通过Protein A亲和层析纯化,后续进行SEC-HPLC确认纯度。
交付成果: 提供2种缓冲体系下的抗体样品(1 mg/mL 和 10 mg/mL),质控数据包括SDS-PAGE图、SEC-HPLC图谱及浓度测定报告。
2、药物研发合作 | 某生物技术公司
项目目标: 快速筛选抗体候选株用于靶点验证与功能阻断实验。
技术方案: 构建重组表达载体,分别在HEK293和CHO细胞中进行瞬时表达,高通量纯化多个抗体候选体,并进行表达量和纯度评估。
交付成果: 提供10株抗体的表达数据及每株 >0.5 mg 的纯化抗体,附带SEC-HPLC、SDS-PAGE分析和浓度测定结果。
3、稳定细胞株开发 | 某国家重点实验室
项目目标: 建立长期可用的CHO稳定表达细胞株,用于后续结构解析与功能研究。
技术方案: 构建抗体表达质粒,筛选高表达克隆,逐步建立稳定细胞株,并通过多轮扩增和冷冻库建立确保批次一致性。
交付成果: 提供经验证的CHO稳定表达株及2批次一致性表达的抗体样品,附带细胞株表达稳定性数据与抗体纯化报告。
Q1: CHO细胞和HEK293细胞在抗体表达中有何区别?
A: CHO细胞适合大规模抗体表达,具备良好的翻译后修饰能力和工业化可扩展性,是目前生物制药中应用最广泛的哺乳动物表达系统。HEK293细胞则更适合快速瞬时表达,周期短、产量快,常用于抗体早期筛选和功能验证阶段。
Q2: 抗体纯化为什么首选Protein A亲和层析?
A: Protein A亲和层析专门结合抗体Fc区域,具有高选择性和高效性,能在一步中获得高纯度抗体,广泛用于单克隆和重组抗体的标准纯化流程。其操作简便、重复性好,适合科研及中试规模使用。
Q3: 如何判断抗体表达是否成功?
A: 可通过多项质控手段评估表达情况,包括SDS-PAGE确认蛋白条带大小、SEC-HPLC检测聚合体比例、浓度测定验证产率。如需更深入评估,还可进行Western Blot、ELISA或功能验证实验。
Q4: 瞬时表达和稳定细胞株表达的区别是什么?
A: 瞬时表达周期短,适合快速获取少量抗体用于筛选或功能分析;稳定细胞株表达则通过基因整合实现长期表达,适合需要多批次、一致性抗体生产的项目,如结构研究或动物实验。
Q5: 重组抗体表达是否适用于所有抗体类型?
A: 是的,重组表达适用于绝大多数抗体类型,包括单克隆抗体、多克隆抗体、人源化抗体、双抗及抗体片段。只需提供抗体序列,即可在哺乳动物细胞中进行可控、可规模化的表达与纯化。