辰辉创聚生物®哺乳蛋白表达服务
随着生物医药、疫苗研发与机制研究的不断深入,对功能性重组蛋白的表达系统提出了更高的要求。相比原核系统,哺乳动物细胞能够提供完整的翻译后修饰(如糖基化、磷酸化、羧基化等),更好地还原蛋白的天然结构与功能,是高等真核蛋白表达的首选。
辰辉创聚生物凭借在蛋白表达领域的深厚积累,建立了高标准、模块化的哺乳表达平台,覆盖CHO表达系统与HEK293表达系统两大技术路径,为科研机构、高校实验室、生物制药公司提供稳定、高效、可扩展的哺乳表达蛋白服务。通过平台化运行、数据标准化管理,我们能够实现从基因合成到蛋白质制备的全流程定制交付。
平台构建与技术优势
辰辉创聚生物构建的哺乳表达平台,融合了分子克隆、细胞培养、生物反应器控制、层析纯化等关键技术,具备以下核心优势:
系统专业性强:平台覆盖 HEK293 与 CHO 细胞瞬时转染与稳定株筛选体系,支持短周期实验表达与长期稳定生产;
表达蛋白多样性广:适用于表达受体蛋白、糖基化蛋白、膜蛋白、融合蛋白、抗体片段、细胞因子等功能敏感分子;
表达调控灵活可控:通过启动子优化、宿主筛选、信号肽设计与表达条件微调,实现目标蛋白的高表达与高活性;
产率与纯度兼顾:整合亲和层析、离子交换、凝胶过滤等技术路线,实现>90%纯度的表达蛋白交付标准;
质控手段完善:采用 SDS-PAGE、Western blot、SEC-HPLC、ELISA 等方法确保蛋白结构完整性和生物活性。
HEK293表达系统具有转染效率高、表达周期短、蛋白修饰接近人源等优点,特别适合:
细胞因子与信号转导蛋白的表达
疫苗候选抗原及病毒样颗粒(VLP)
实验验证所需快速表达小批量蛋白
蛋白质-蛋白质互作及功能筛选研究
我们通过瞬时转染与稳定株构建两种策略,为客户提供从微量实验室级到放大级别的灵活支持,满足多场景需求。
CHO表达系统是最常用于生物制药的哺乳动物表达系统,具备良好的生物安全性和工业级放大能力。其优势包括:
表达产量高,适用于中试和生产级别需求
稳定表达时间长,支持长期蛋白生产项目
翻译后修饰与人源蛋白高度相似,适合构建功能蛋白和抗体药物
在CHO系统中,我们提供稳定细胞株筛选服务,并支持多达10–50 L 的蛋白表达放大培养,为客户构建具备商业潜力的候选分子。
服务流程
项目目标:表达肿瘤靶向治疗用纳米抗体-细胞因子融合蛋白
技术方案:
采用ExpiCHO-S细胞悬浮培养系统
构建含IL-2和VHH纳米抗体的融合表达载体
优化温度(32℃)和补料策略(添加植物水解物)
项目成效:
获得活性融合蛋白产量8.5 mg/L
体外实验显示特异性靶向肿瘤细胞
为后续动物实验提供足量样品(累计制备25mg)
项目目标:建立新冠病毒RBD蛋白哺乳动物表达平台
技术方案:
使用HEK293-6E细胞进行瞬转表达
载体设计含tPA信号肽和双His标签
开发两步纯化工艺(镍柱亲和+分子筛)
项目成效:
蛋白表达量达15 mg/L(1L培养规模)
糖基化质谱显示正确修饰模式
已应用于5篇SCI论文实验
项目目标:提高难表达膜蛋白产量
技术方案:
测试三种不同信号肽(CD5、IL-2、HSA)
比较HEK293和CHO-K1表达效率
添加分子伴侣共表达载体
项目成效:
最优条件下产量提升6倍(从0.8到4.7 mg/L)
建立膜蛋白快速筛选流程
为3个课题组提供技术服务
经验丰富:服务超千项蛋白表达项目,涵盖科研与企业级客户
交付稳定:哺乳表达成功率 >90%,纯度≥95%,活性可验证
周期可控:标准项目7–14个工作日交付,特殊项目灵活定制
团队专业:具备细胞工程、分子生物学、蛋白纯化等多学科背景团队
技术持续优化:不断更新载体系统与培养工艺,保持行业前沿能力
Q1:哺乳表达服务的项目流程是怎样的?
A:辰辉创聚生物承接项目通常分为五个阶段:需求沟通 → 基因合成/载体构建 → 细胞表达 → 蛋白纯化 → 质控与交付。客户可选择全流程服务,或根据实际需求委托某一单项环节。
Q2:如果已有表达载体,还可以委托哺乳表达服务吗?
A:完全可以。辰辉创聚生物支持客户提供现成的表达质粒、基因片段或稳定细胞株,技术团队将根据表达系统需求进行适配与后续表达优化。
Q3:哺乳动物细胞表达需要多长周期?
A:一般瞬时表达项目7–10个工作日可交付蛋白,稳定细胞株构建和表达项目时间较长,具体周期根据蛋白复杂程度与客户需求评估确定。
Q4:项目期间客户可以获取哪些中间数据?
A:辰辉创聚生物在项目关键节点(如质粒构建完成、表达验证、纯化前检测等)可提供阶段性数据和图谱,包括SDS-PAGE、电泳图、蛋白浓度等,以便客户实时了解项目进展。
Q5:是否支持大规模哺乳表达项目的定制?
A:辰辉创聚生物的哺乳表达蛋白平台配备10 mL到50 L不同规格的悬浮培养体系,可根据客户需求调整表达规模,满足从实验研究到中试开发的不同场景。
联系方式
北京辰辉创聚生物技术有限公司
电话:15801534258
QQ:2369446524
邮箱:info@nebulabio.cn