致力于药物研发关键试剂的生产

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辰辉创聚生物®纳米抗体制备


背景介绍

纳米抗体一种来源于骆驼科动物体内、天然缺失轻链的重链抗体可变区,分子质量只有15kDa,是常规抗体分子质量的1/10。其蛋白质晶体结构长度为4 nm,直径为2.5 nm,是目前已知分子质量最小的抗体,因此称之为纳米抗体。相比于传统抗体(图1a),纳米抗体(图1b)的活性结合区域较长,氨基酸数量多达16~18个,且其温度稳定性及有机溶剂耐受性更强,部分还可耐受蛋白酶,也能耐受更广的酸碱范围(传统抗体仅耐受pH6~9,纳米抗体可耐受pH2~11)。基于其稳定性、穿透力等方面的优势,目前纳米抗体在疾病治疗、诊断及物质检测等领域广受关注。

 

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图1 传统抗体与纳米抗体的对比

服务内容

辰辉创聚生物®可提供:包括抗原制备、羊驼免疫、VHH纳米抗体噬菌体文库构建、VHH纳米抗体淘选全流程服务。

项目

内容

周期

交付标准

抗原制备(可选)

Ø基因合成

Ø质粒构建

Ø表达纯化

Ø质检

2-3

Ø1-10mg抗原蛋白

ØSDS-PAGE纯度>85%

Ø内毒素<1EU/mg

羊驼免疫

Ø免疫4

Ø采血

Ø检测每次血清效价

Ø羊驼外周血PBMC提取

8-12

Ø羊驼外周血PBMC

Ø提供血清效价数据

ØIgG效价达110^5

免疫文库构建

ØRNA提取

ØcDNA制备

ØPCR扩增纳米抗体可变区

Ø连接载体并电转化

Ø计算库容量

Ø测序验证多样性

5

Ø库容量达到10^810^9

Ø细菌库

免疫文库淘选

Ø噬菌体展示淘选

ØELISA/FACS筛选

Ø测序

4

Ø提供10株以上抗体基因序列

Ø提供抗体氨基酸序列

 

辰辉创聚生物®提供千亿级天然纳米抗体库快速淘选服务,最快2周内获得候选分子。

项目

内容

周期

交付标准

抗原制备(可选)

Ø基因合成

Ø质粒构建

Ø表达纯化

Ø质检

2-3

Ø1-10mg抗原蛋白

ØSDS-PAGE纯度>85%

Ø内毒素<1EU/mg


天然文库淘选

Ø噬菌体展示淘选

ØELISA/FACS筛选

Ø测序

4

Ø提供10株以上抗体基因序列

Ø提供抗体氨基酸序列


此外,辰辉创聚生物®还提供亲和力成熟、抗体人源化、重组抗体构建表达及克级生产服务,欢迎咨询info@nebulabio.cn