辰辉创聚生物®纳米抗体制备
背景介绍
纳米抗体一种来源于骆驼科动物体内、天然缺失轻链的重链抗体可变区,分子质量只有15kDa,是常规抗体分子质量的1/10。其蛋白质晶体结构长度为4 nm,直径为2.5 nm,是目前已知分子质量最小的抗体,因此称之为纳米抗体。相比于传统抗体(图1a),纳米抗体(图1b)的活性结合区域较长,氨基酸数量多达16~18个,且其温度稳定性及有机溶剂耐受性更强,部分还可耐受蛋白酶,也能耐受更广的酸碱范围(传统抗体仅耐受pH6~9,纳米抗体可耐受pH2~11)。基于其稳定性、穿透力等方面的优势,目前纳米抗体在疾病治疗、诊断及物质检测等领域广受关注。
图1 传统抗体与纳米抗体的对比
服务内容
辰辉创聚生物®可提供:包括抗原制备、羊驼免疫、VHH纳米抗体噬菌体文库构建、VHH纳米抗体淘选全流程服务。
项目 | 内容 | 周期 | 交付标准 |
抗原制备(可选) | Ø基因合成 Ø质粒构建 Ø表达纯化 Ø质检 | 2-3周 | Ø1-10mg抗原蛋白 ØSDS-PAGE纯度>85% Ø内毒素<1EU/mg |
羊驼免疫 | Ø免疫4次 Ø采血 Ø检测每次血清效价 Ø羊驼外周血PBMC提取 | 8-12周 | Ø羊驼外周血PBMC Ø提供血清效价数据 ØIgG效价达1:10^5 |
免疫文库构建 | ØRNA提取 ØcDNA制备 ØPCR扩增纳米抗体可变区 Ø连接载体并电转化 Ø计算库容量 Ø测序验证多样性 | 5周 | Ø库容量达到10^8~10^9 Ø细菌库 |
免疫文库淘选 | Ø噬菌体展示淘选 ØELISA/FACS筛选 Ø测序 | 4周 | Ø提供10株以上抗体基因序列 Ø提供抗体氨基酸序列 |
辰辉创聚生物®提供千亿级天然纳米抗体库快速淘选服务,最快2周内获得候选分子。
项目 | 内容 | 周期 | 交付标准 |
抗原制备(可选) | Ø基因合成 Ø质粒构建 Ø表达纯化 Ø质检 | 2-3周 | Ø1-10mg抗原蛋白 ØSDS-PAGE纯度>85% Ø内毒素<1EU/mg |
天然文库淘选 | Ø噬菌体展示淘选 ØELISA/FACS筛选 Ø测序 | 4周 | Ø提供10株以上抗体基因序列 Ø提供抗体氨基酸序列 |
此外,辰辉创聚生物®还提供亲和力成熟、抗体人源化、重组抗体构建表达及克级生产服务,欢迎咨询info@nebulabio.cn