辰辉创聚生物依托先进的抗体表达平台,结合成熟的CHO表达系统和HEK293哺乳动物细胞表达系统,为客户提供高效、稳定的抗体蛋白表达解决方案。平台支持瞬时转染与稳定细胞株构建两种表达策略,覆盖抗体研发到生产的各个阶段。
核心技术优势
采用高性能CHO细胞系,优化基因转染与培养工艺,实现抗体蛋白的高表达和高纯度。CHO系统具有优异的蛋白折叠和糖基化能力,是工业化抗体生产的主流平台,适用于重组抗体表达及复杂抗体分子的生产需求。
HEK293细胞具有快速增殖和高转染效率的特点,适合早期候选抗体的快速表达与功能验证。该系统能够表达多种抗体类型,保持蛋白天然构象和活性,支持快速筛选与验证阶段的需求。
结合CHO和HEK293系统的瞬时转染方法,平台可在5-10天内快速获得大量功能性抗体表达产物,显著缩短研发周期,满足抗体快速表达及早期开发需求。
通过高通量筛选和克隆扩增,构建高表达稳定细胞株,实现目标抗体的持续稳定表达。该服务适用于长期生产和大规模工艺放大,确保产品批次间一致性和质量稳定。
抗体纯化服务
采用多种层析技术(如Protein A/G柱)对表达抗体进行纯化,确保产品纯度和功能完整。
质量检测
提供包括SDS-PAGE、SEC-HPLC、ELISA等多维度质量检测手段,保障抗体产品的稳定性和生物活性。
定制抗体表达方案
针对不同抗体分子特性,设计个性化表达工艺,提高表达效率和蛋白质量。
项目目标:快速表达新型人源化单克隆抗体用于体外功能验证。
技术方案:HEK293 瞬时转染,优化密码子,Protein A 纯化。
交付成果:10 mg 抗体,纯度 >95%,附表达与纯化报告。
项目目标:构建高表达 CHO 稳定细胞株用于双抗中试开发。
技术方案:CHO-S 稳转,限稀筛选,表达量评估。
交付成果:稳定克隆1个,表达量达 500 mg/L。
项目目标:表达重组抗体 Fab 片段用于中和实验与结构研究。
技术方案:HEK293 瞬转,优化信号肽,双步层析纯化。
交付成果:Fab 片段 8 mg,纯度 98%,用于SPR与冷冻电镜分析。
Q1: CHO 和 HEK293 表达系统的工艺差异主要体现在哪些方面?
A:CHO 细胞具备更优的糖基化一致性与工业化潜力,适用于治疗性抗体和CMC开发;HEK293 适合早期项目,瞬时转染效率高、周期短,适合快速筛选与功能验证。在实际项目中,辰辉创聚生物根据抗体结构、预期用途、表达规模和时间要求综合评估,制定系统选择与工艺策略。
Q2: 在构建稳定表达细胞株时,如何保障克隆稳定性与表达一致性?
A:稳定细胞株构建流程包括载体线性化、药筛压力梯度筛选、限稀单克隆化及连续传代评估(≥20代),结合qPCR进行整合拷贝数检测,同时通过多批次小规模表达验证表达量波动,确保选定克隆具备工业化可用性。
Q3: 不同类型的抗体(全长IgG、Fab、scFv等)在表达策略上有哪些差异?
A:全长IgG 表达结构明确,工艺相对成熟;而Fab、scFv、VHH等抗体片段则对信号肽设计、连接肽长度、折叠效率及聚集风险更为敏感。平台在构建层面会针对不同结构优化载体设计,调整表达体系参数以实现高效表达和可溶性提升。
Q4: 抗体表达完成后,可支持哪类功能验证?
A:标准交付包括 Protein A 纯化、SDS-PAGE、SEC-HPLC、UV定量等基础质控。可选服务涵盖内毒素检测、等电点、抗原结合活性(ELISA/SPR)及Fc功能分析(ADCC/CDC报告分析),满足不同阶段需求。
Q5: 平台支持表达哪些类型的抗体?是否兼容复杂构建如双抗、融合蛋白等?
A:平台兼容多种抗体分子形式,包括IgG、Fab、scFv、VHH、双特异性抗体、Fc融合蛋白等。对于复杂构建,我们可协助进行结构设计评估、构建策略建议(如双载体/单载体表达)与表达可行性验证,支持从发现到开发的多阶段技术路径。